Título

COMPARAÇAO DA RUGOSIDADE DE ENXERTOS CORNEANOS POR MEIO DA MICROSCOPIA DE DESFOCALIZAÇAO

Objetivo

Analisar a superfície dos enxertos de córneas humanas, preparados através das técnicas DMEK, DSAEK, DSEK e suas variações, por meio da microscopia de desfocalização.

Método

O experimento da microscopia de desfocalização consistiu na coleta de imagens/filmes da superfície das córneas, preparadas para transplante endotelial, em diferentes desfocalizações. Movendo-se o plano focal, era obtida uma imagem média a partir de um filme de 50 quadros. Foi utilizada uma câmera acoplada a saída do microscópio invertido responsável pela captura de imagens, sendo a taxa de aquisição utilizada de 15 quadros por segundo (fps). Os experimentos foram realizados utilizando-se objetivas com três diferentes fatores de ampliação: 10x, 20x e 40x. A área capturada foi de 0,59 mm2, 0,15 mm2 e 0,038 mm2, respectivamente. Para o processamento das imagens era utilizado o programa Image J (software livre do NIH) e o perfil das córneas era obtido através do programa Matlab (MathWorks, Natic). Em cada amostra analisada foram obtidos parâmetros de rugosidade, como o índice de rugosidade 1 e 2 da microscopia de desfocalização (MD), que permitiram comparação objetiva das superfícies evitando-se o viés da subjetividade. O índice de rugosidade 1 da MD foi obtido a partir da diferença entre as alturas obtidas e a média, dividido pela área analisada. Já o índice de rugosidade 2 da MD foi obtido à semelhança do cálculo para desvio padrão.

Resultado

Não foram observadas diferenças estatisticamente significantes entre as técnicas de preparo para transplante endotelial utilizando-se os dois índices obtidos com a microscopia de desfocalização.

Conclusão

A microscopia de desfocalização se revelou como ferramenta útil na análise das superfícies de enxertos corneanos preparados para transplante endotelial, apesar de não ter mostrado diferença significativa entre os grupos devido o número amostral de cada grupo. Houve tendência de evidenciar a técnica DMEK como enxerto mais liso.